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生物知识

细胞培养常识(二)

作者:admin 来源:本站 发布时间: 2016-09-13 15:37  浏览次数:
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1
培养细胞时应使用5%或10%CO2?

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为PH缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时。则应使用5%CO2培养细胞。(配置培养基时,如果搅动过多会使 NaHCO3转变为气体而丢失,使培养基的PH缓冲能力下降。)

 

2
何时须更换培养基

视细胞生长密度而定,扑满皿或瓶即可更换培养基即可。

 

3

培养基中是否须添加抗生素?

 

除于特殊筛穿系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。

 

4
欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?

欲回收动物细胞,其离心速率一般为300g(约1000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡。

 

 

5
细胞冷冻培养基之成份为何?

动物细胞冷冻保存时最长使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成。

 

6
DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?

冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grand之DMSO,基本身即为无菌状况,第一次开瓶后应立即少量分装与无菌试管中,保存于4度,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则需使用耐DMSO之Nylon材质滤膜。

 

 

 

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