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生物知识

细胞培养常识(三)

作者:admin 来源:本站 发布时间: 2016-09-20 18:43  浏览次数:
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冷冻保存细胞之方法?

冷冻保存方法一:冷冻管置于4度30-60分钟至-20度30分钟至-80度16-18小时(或隔夜)至液氮槽vaporphase长期储存。

冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3度至-80度以下,再放入液氮中长期储存。-20度不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80度冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

2
这细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内有多少细胞浓度

冷冻管内细胞数目一般为1*106 cells/ml vial, 融合瘤细胞则以5*106 cells/ml vial 为宜。

 

3
可否使用应如何避免细胞污染?

细胞污染的种类可分为细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌、主要的污染源因为无菌操作记住不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。

 

4
这支原体污染的细胞,是否能以肉眼观察出异状?

不能。除极有经验之专家外,大多数遭受支原体污染的细胞株,无法以其外观分辨之。

 

5
CO2 培养箱之水盘如何保持清洁?

定期(至少每两周一次)以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。

 

 

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